生物实验心得

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2025-12-15心得

短文网整理的生物实验心得(精选6篇),快来看看吧,希望对您有所帮助。

生物实验心得 篇1

自从今年九月份申报《农村初中生物实验教学方法研究》微课题以来,已经快四个月了,在研究的个过程中,从课题的准备阶段开始到资料的收集整理、调查研究、案例分析、调查分析、历年的实验试题的分析等工作,在研究的过程中我对初中生物学的实验教学的认识和理解有了更深刻的理解,在教育教学的理念、教学的方法、教育中对生物的课本教材的学习和初中生物学课程标准有了更好的把握和理解,在课堂教学和实验教学中更能有的放矢,更好的提高生物教学的效率。

初中生物是一门以实验为基础的自然科学,在教学中要帮助学生不断建立生物学的概念、获得生物学的基本知识和基本技能,使学生在生物学的学习过程中和实验操作中能形成严谨的科学素养和正确的人生观和价值观。

生物学实验是生物课堂教学中的非常重要的一部分,是其它多媒体设备和技术所不能代替的,在我们的课程理念中我们要面向全体学生、提高学生的生物科学素养、倡导探究性的学习。生物学中的这些课程的基本理念只有在生物学的学生的实验操作技能中体现和彰显生物学科特色,也是培养学生创新能力提高学生团队合作精神的有力途径,为学生以后的成长和成才打下基础。

通过对课题的研究和学习,我在对课标的学习和认识比以前有了巨大的改变,在教学的过程中能更好的把握教材的重难点,抓住课堂教学侧重点,能用课程理念面向全体学生来指导教学,用课标的最标准来要求所有的学生,让全体学生尽力的达到课标中的要求,在对学生的评价中,不仅是只看学生的考试成绩,更重视学生的多元化的评价,从评价的内容上更多的考虑学生各个方面的综合素质。我主要从学生的以下几个方面进行考核,给学生一个客观的评价1.学生在学习过程和方法。课堂上完成问题的思路、参与学习和合作学习的能力、与同学进行交流的能力。2.学生在实验操作过程中完成实验的过程和方法,对实验的探究的目的、方法、过程和反思以及与现实生活结合的情况。3.学生在学习中的情感和价值观的体验情况,对知识的应用和转化在实际生活中的应用,对社会中关注的生物学中的问题和前沿科学的关注度和自己所保持的观点和看法。通过这些多方面多层次的评价,也是我在平时教育教学中比较知识的方面,可以给学生一个科学的评价。

通过对课题的研究和平时的学习,在实验室是的建设上有了更上一步的改进,根据我校的实际情况,对实验室进行了生物和化学的分类,增加了一些教师和学生的自制实验器材(例如:植物细胞和动物细胞的模型制作、单细胞动物草履虫的模型制作、人体肺的呼吸、验收植物细胞的吸收失水原来的验证、物质中含有能量验证、植物的疏导作用等)发动学生做一些学具,既增加了学生的动手能力,还提高了学生对知识的理解。另外我还常用一些生活中的塑料瓶、塑料管,纱网等来代替一些生物实验中的器材,让学生理解其实实验就在我们的随便,就看我们有没有发现的眼光。

通过课题的研究,我对生物中的微观观察实验进行了改进,因为我们在显微镜下观察细胞时,看到的是一些微小的生物,学生看到的现象是各种各样的,有的是看到的细胞、有的看到的不是细胞,为了利于教师向学生讲解实验中的细胞图像,采用在显微镜目镜的上方用相机将图像拍下,在利于多媒体白板将图像投影在白板中,这样放大了图像,利于学生的观察和对比以及老师的讲解图像。另外在一些观察动物的实验时,增加了学生的情感教育和珍爱生命的感觉教育,1.在观察小鱼尾鳍的血液循环时,将小鱼放在培养皿中,用湿润的纱布将小鱼的的头和躯干包裹住,保证小鱼身体湿润正常的呼吸,等小鱼的情绪稳定不在乱动后再在显微镜下观察小鱼毛细血管的血液流动方向,判断血液的类别。待做完实验后将小鱼放回河流,做到珍爱生命。2.在观察小鱼的呼吸和观察土壤中的动物实验时,将做完实验后的小鱼和蚯蚓放回到大自然环境中,给学生讲述珍爱生命、尊重生命的情感教育和人生价值 观的教育。3.在做人体肺部的呼吸实验时,学生动手,利于橡胶管、玻璃管、气球等完成演示肺部呼吸实验的过程。该实验提高了学生的动手能力,也提高了学生对知识的理解。

通过对课题的研究和学习,在自己的课堂教学中,我的教学思路和方法得到了改变,教学的效率得到了提高,老师教的给能体现课程的教学理念,学生的学习的兴趣也得到了提高。在课堂中以学生的学为主体,老师的教为辅,冲分发挥学生的学习的能力和个性差异,按照学生的特点,对学生在教学探究合作学习和课堂讨论中,对学生进行分组,给每一个小组(5—6)的每一位同学进行分工,根据学生的能力的大小,完成不同的任务,分工主要有小组长(活动组织者)、计时员(均衡时间)、纪律维持者(控制纪律)、记录人(语言转化为文字)、发言人(思维强、顾全全组发言)、第二发言人(补充发言),发言时要求他们说“我们组.......”,每个组展现的形式也可以多元化,可以是文字,也可以是图片,也可以是其他形式,每组之间有了竞争,增强学生的团队意识。这样让学生都有事干,有发挥自己的作用,有自己的价值,也锻炼了学生语言能力和每个组发言后做出评比,最后老师进行点评各个小组的优点和不足,最后总结归纳。通过教学方法的改进,学生的学习积极性提高了,成绩较以前有了明显的进步,尤其是主观性的试题准确率变化大,准确率高了。

总之,通过对课题的研究和学习,我的业务水平得到了明显的提高,教育教学的理念也发生了改变,但是,在研究的过程中,由于实际的条件的限制,还存在这样和那样的不足,我将在以后的工作和学习中利于各种渠道和方式继续学习,将自己的业务水平在提高新的台阶,取得更大的进步。

生物实验心得 篇2

大三的第二学期块结束了,这个学期操作了四个微生物实验,以及一个自主设计性实验。通过前阶段对四个实验的操作和认知的基础上,展开第五个实验的自主设计。实验分别是菌落总数测定,霉菌和酵母的检查和计数,乳酸菌的检验,微生物药敏试验以及探讨环境因素对微生物生长的影响。

这学期的微生物实验是在上学期微生物实验的基础上的累积和扩展延伸:以培养基的制备与灭菌,玻璃器皿的洗涤、包扎和灭菌,微生物接种技术和细菌的革兰氏染色为技术基础进行的,以加强学生基础理论知识和基本技能的培养为目的。

下面我来谈谈我在实验中的心得体会。

第一个实验是菌落总数测定。让我重新认识了一下这个名词:菌落形成单位,我现在的理解就是:1ml或者1g待测样品中菌落的个数,一定要注意的是单位是CFU/ml或CFU/g。还有就是要掌握好对高压蒸汽灭菌锅的操作。实验之前要充分做好预习工作,以便实验的进行。由于是测定微生物实验,就要尤其小心其他杂菌的混入影响实验结果。因此要做好实验仪器和各种试剂的灭菌,有培养皿,试管,移液枪头(装在盒子中),按要求配置好的琼脂培养基和生理盐水,按各自要求用纱布和报纸包扎好,送入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。玻璃仪器在包扎前要进行清洗,并烘干,以免水分沾湿报纸。灭完菌后取出物品进入超净工作台,超近工作台的紫外灯在进入20分钟前开启,并在进入时关闭,以免影响人体。要对台面进行消毒处理,用酒精擦拭。可以在等待琼脂培养基冷却到50摄氏度左右前对待测样品进行10倍系列稀释至需要的浓度。要注意的是一定要标记好浓度或者按顺序排列在试管架上以免弄混,同一个试管里吸取样品才能用同一个枪头进行移液。再进行平板接种。待琼脂培养基冷却好后,用右手打开纱布并将锥形瓶拿住,将瓶口靠近酒精灯再进行灭菌,左手拿培养皿用大拇指和食指稍微打开培养皿盖,将琼脂培养基倒入培养皿中心内,不用倒很多,使琼脂培养基没过培养皿表面即可。培养皿一定是平拿在手上的,倒好后轻轻盖上培养皿盖,缓慢地平方在超净工作台台面边缘处,再推至中间。再用移液枪取1ml样品快速打入培养皿中央,盖上培养皿盖,然后用手轻轻摇晃,千外不要太大力。然后贴上标签记号,静置。如此依次操作下去。静置一段时间待培养基凝固后倒置放入恒温培养箱培养一段时间再取出进行观察计数。

我们组的实验结果不甚理想,培养皿中的微生物都是连成一片的,或者是培养皿壁上也都长着,主要是由于待测样品打入培养皿后,摇晃不均匀或者太大力了,以至于菌液没分散开来或是跑到培养皿壁上去了。

第五个实验是自主设计实验环境因素对微生物生长的影响。选取3个环境因素物理、化学和生物因素均可进行设计。根据前四个实验的基础,通过小组探讨和交流设计出实验方案。并加以验证。通过自主设计实验可以结合小组的智慧,加强团队协作精神和创新思维,通过实验可以验证理论,增加感性认识,培养独立工作能力和思考能力,并使具有过硬的专业技术水平。

通过这次的实验,我明白了任何事情丢不是一蹴而就的,而是一个慢慢积累的过程。虽然实验结果不是很理想,但是我参与了过程,通过小组讨论我们也分析了失败的原因,找到了解决的方法,避免了下一次失误。并且从中理解了团队讨论和合作的重要性。以上即是我的全部感想。

生物实验心得 篇3

一、开拓我的实验教学眼见

有些实验在平时教学时,总觉得过于复杂繁琐,从没有去实践操作过,更没有想过新改进,而这次真的让我开了眼界,如:探究光合作用的原料和条件,可以同时探究二氧化碳、水、阳光三个因素,探究水时用单面刀片切叶脉使无水和有水形成对照,探究阳光这个条件是,在脱色时用锥形瓶代替小烧杯效果更好,而且节省能源又安全,又如:焦作市第十九中学的原艳玲老师探究的绿色植物的呼吸作用产生二氧化碳,消耗氧气这个实验,她大胆尝试,用注射器抽取气体验证二氧化碳的做法,既简单又便于操作,材料选取方便,可以轻易实现重复实验,不怕多班教学材料用具准备不足,探究吸烟危害健康中邓春老师用蟋蟀、蝗虫、蚱蜢等昆虫代替水蚤,效果比水蚤明显得多,这些无不与平时的扎实功夫密切联系,无不与教师的孜孜不倦、努力尝试实践相联系。

二、体会到实验教学创新之艰难

各位选手进行了精彩的表演后,选出了前两名,这前两名教师介绍自己的教学经验和平时教学中的做法是,原艳玲老师提出了“指尖上的生物学”让我大开眼界,明白了可以用生活中废弃品为材料,变废为宝,为生物学服务,如教材中的绿色植物的呼吸作用,灌水排气法操作复杂,效果不明显,在实践过程中,原艳玲老师和她的学生还发现了煮熟的菜豆放时间长了也会发酵,也会使石灰水变浑浊,这个细微的发现足见她平时功夫之深;xx第三中学的崔键老师创新了“测定食物中的能量”时,先从课程标准解析,确定了本课的学习目标,然后小组合作探究新知,这样学生充分地参与,将原有的装置改成了三个版本,即改进版1.0,升级版2.0,终极版3.0,这样的成果是多么壮观,彻底改变了学生的学习方式,变被动为主动,这些是我在平时教学中根本没有做到的,看到后深感惭愧,自叹不如。后来,一位高中组的老师讲的《渗透实验的改革》,也让人铭记在心,他为了解决半透膜的问题,不断地尝试,用鱼鳔,用猪膀胱,用鸡蛋膜,用洋葱内表皮,不断地尝试,困难重重,但从没有放弃,解决了又遇到怎么固定,仍是不断地探究,真切地体验到作为科学家的坚持不懈的精神。

总之,本次学习之旅收获不少,也见识了许多教学能手的真知灼见,实验创新应让学生多参与,多给学生进行实验的机会,实验创新应落实在课堂上,不要再望而却步,不要再纸上谈兵,要实实在在地进行。

生物实验心得 篇4

4月8日市里举办生物教师生物实验培训,这是一个非常难得的机会。因为自己不是专业生物教师,不论是生物知识,还是实验技能都懂得不多。这几年的生物教学勉强还能应付,当听说19年要考生物实验,真的感觉压力巨大。还好有了这次机会我一定把握好机会。

那天我们学习了四节课。分别是:用显微镜观察洋葱鳞片叶内表皮细胞、用显微镜观察人的口腔上皮细胞、观察人血的永久涂片、观察酵母菌以及观察菜豆、玉米的结构共六个实验。老师先讲解,我们随后操作。在显微镜对光、对焦中,我遇到了困难,尝试几次都没有成功。后来,在老师的帮助下,终于对好了。这是一个良好的开端,在以后的操作中,比较很顺利。

到了观察口腔上皮细胞时,又出现了问题:视野中出现了大的条形结构,没有看到细胞。在老师的操作后,才知道是刮取上皮细胞时,出现了杂质,而且镜头有些不干净,所以出现了失误。

经过培训,心里总算有了一点安慰,希望这样的机会多些,更好地完成教学和中考任务

生物实验心得 篇5

生物学是一门以实验为基础的自然科学。生物学的理论也是人们通过实验总结出来的。许多生物现象只有通过实验才能得到解释,各种生物体的结构必须通过实验才能观察清楚,所以实验教学在生物教学中占有非常重要的地位。同时,生物学实验可以向学生提供生物界的感性认识,培养初中生学习生物学的基本技能和观察、分析综合运用生物学知识的能力。可以激发初中生学习生物学的兴趣,培养实事求是的科学态度。

初中生物实验包括观察能力、实验操作能力、分析实验现象能力、实验设计能力、综合应用能力。因此,组织好实验教学对学生学好生物学有着相当重要的作用。要搞好初中生物的实验教学,我认为初中生物实验教学过程中必须始终坚持三个基本原则,即:客观性原则;严谨认真的原则;尊重学生,灵活引导的原则。下面是我在实验教学中的一些心得。

一、首先要养成良好的实验习惯

“没有规矩,不成方圆”。从实验听课中,更能深刻的体会。实验室守则和实验规则是上好实验课的保证,为了培养良好的实验习惯,使实验顺利进行,必须向学生强调遵守实验室守则和实验规则的重要性。并要向学生讲清道理,反复教育,使学生明白并自觉遵守,保证实验室内环境安静。要求学生不到下课时间,不准擅自离开实验室。总之,要养成有组织、有纪律的实验习惯和良好作风。要关心爱护教学仪器,节省实验材料。在做每个实验前后,要求学生一定要养成洗手的习惯,以免实验时玷污实验仪器和试剂、样品、标本,从而引起实验误差,同时还要求学生不应做与本实验无关的动作,以免损坏实验仪器,甚至发生意外事故。要始终保持实验室整洁卫生。要养成整齐清洁的实验习惯。实验过程中不得乱丢纸屑、杂物。实验结束后要清理实验仪器,把仪器放回原位,清洁实验桌凳。

二、预习好实验内容,明确实验过程

只有让每个学生弄清了每个实验的内容、操作步骤、注意事项、实验目的和每个实验的全过程,这样学生才能做到心中有数,进入实验室才能有条不紊地进行实验操作。在学生在观察时,①首先提出目的和任务;②拟定计划;③按计划认真仔细观察;④提出问题寻求答案。这样才能保证注意力集中在所要观察的物体上。例如:王晓英老师所讲的唾液对淀粉的消化作用,目标明确,条理清晰。按照科学探究的六个环节,一步一步逐层深入,并且在学生充分讨论设计实验的基础上完成实验。在此前提下,学生就会多的是理性认识,而少了手忙脚乱。

三、力求实验创新

1。增设实验,促进学生对知识理解。例如:韩海老师在讲课中所提到的如果用洋葱的外表皮对实验有什么影响?这样在某些教学中一些激趣实验,既能激发学生学习兴趣,活跃课堂,又能帮助学生理解和掌握知识。

2。改进实验形式促进学生能力提高。教材中大量实验为老师演示实验,学生动手机会少,不利于技能的提高和对实验的理解,因此我们可以把某些实验让学生演示,例如植物的呼吸作用:可以让学生自己准备实验器材,把菠菜或油菜放到黑塑料袋扎紧,学生演示时老师要诱导,实验结束后,教师要即时点评,我们也可以把某些实验改为随堂分组实验,老师可以边讲解理论,边让学生进行分组实验,这既可以增加学生训练技能的机会,又能增加学生对知识的理解。3。注重探究实验,促进创新意识提高。探究既是学习的目标,又是学生学习的方式探究性实验中的实验仅仅是手段,是学生的认知工具,实验教学的根本目的在于培养创新精神和实践能力教材中的实验多为呈现性实验或验证性实验,如果处理不好,学生就最多学会“是什么”,而根本不懂“为什么”,更谈不上“创什么”,所以我们老师应放手让学生自己完成一些探究实验,不管结论是对与错,只要学生去做,我们就应当予以鼓励。

4。注重选材,这个材既指实验材料又指实验器材。初中生物实验特点是,大多数实验材料需要自己采集、培养、选定。许多实验由于实验材料选择不当而告失败。在听课中可以充分体现这一点。例如都是做Vc含量的测定,有的老师所选取的器材出汁率高,实验现象非常明显;还有唾液对淀粉的消化作用,刘老师只用了一个酸石榴就取得了意想不到的效果。

四、合理分组,加强对学生指导。

学生是学习的主体,为了避免学生只看热闹而丢了门道,老师要指导学生设计及分工,实验中老师要做好巡回指导,及时发现和纠正学生中的错误,做到重点深入,个别指导与普遍照顾相结合。指出问题所在,表扬与鼓励表现突出的学生,让他们在每次实验中体会到成功和自豪。同时老师还应伴随讲解,诱导学生思考,从而真正理解实验内容和掌握所学知识。

以上就是本人根据多年实践经验,对中学生物教学实验的总结和看法,这里本人所说的也只是一家之言,希望能起到抛砖引玉的作用,更好的推动我们的生物实验教学工作。

生物实验心得 篇6

在真正投入到创新实验计划当中之前,我以为不会很难。因为课内实验我们也做了很多,只要做好预习工作,好好听老师的讲解,再加上自己多动脑筋,几乎没遇上什么比较大的困难,实验完成起来也比较快。各种各样的实验加起来,涉及的知识面很广,学到了很多,让自己对于这样的研究与实验工作也更加感兴趣。

但是真正开始创新实验计划时,发现我仿佛进入了一个新的空间。一切要从头学起,从最简单的做起。与高年级的学长比起来,自己的基本实验技能与专业知识少的可怜,面对那些精密的仪器与无数的文献资料,信心一下子被浇熄了大半。每天跟在学长后面做着清洗瓶子,到扫卫生,摘桑叶,诸如此类的体力活。貌似什么也学不到,看着学长学姐一言不发的熟练操作,却一点也摸不到头脑。有时真的懊恼的有些想泄气,但幸亏老师常常与我们开会讨论,开导鼓励我们,他还时常有意无意地启发我们的安全防范意识。古语说的没错:耳濡目染。一天天下来,不知不觉当中,我们的实验技巧越来越熟练,对于一些仪器的基本操作也能单独上手,学长学姐很有耐心地一次次纠正我们犯下的或大或小的错误,并不厌其烦的叮嘱我们注意安全。

渐渐地我们可以单独完成一些比较系统全面的实验工作。但错误当然也是不可避免的,而且人往往要犯错之后才能明白如何不犯错和为什么不要犯下这样的错误。比如因为我们某一步的实验操作不规范,导致最后的实验结果不尽入人意,无法纳入最后的总结分析中,也就是说我们白忙活一场。其实这样的失败也未尝不是一件好事,通过它我们更加清晰地认识到这个实验步骤的原理、影响及具体细节。

重复这是整个实验过程中常做的一件事,面对规律性不强的实验结果,我们只有一次次反思,重新再来,如果一而再再而三的重复失败,我们就只得求助于学长学姐和老师们了,但是这样具体的操作细节中失误,非当事人又是无法完全了解的,还是需要我们自己一点一点的去摸索。

当然整个实验过程中最困难的还要数自行设计实验的具体步骤了,老师所能给的知识一个全面概括的指导意见,让我们不致发生方向性的失误。老师也给了我们一些相关的文献资料,但同样的道理,具体到某一方面我们还是要自己去搜索,筛选,概括。有时甚至要面对一些英文文献,仅凭我们已有的英文水平还过于单薄。困难就是让人来解决的。我们摸索前进,自己跑到机房查资料,下载翻译软件,制定实验方案,阅读大量晦涩难懂的文献,失败了就再来一次,总结后再勇往直前。困难一个接着一个,但既然选择了这条路,我们就要毅然决然的走下去,不管后面的路是沼泽泥泞还是荆棘丛生。

终于我们的实验数据慢慢变得有规律起来,面对棘手的麻烦我们也能镇定自若,实验的因素探索一个个完成,一点点接近于目标。回望之前,发现与取得的成绩,获得的知识相比,以前都算不了什么。

不得不承认,通过这项本科实践创新训练项目,我们学到了很多,得到了很多,有些是书本上永远也学不来的,有些仅靠我们自己摸索几乎为不可能的,有些仅凭我们自行监督是无法坚持下来的。

在这里要感谢关心爱护我们的老师,学长学姐还有同届同学以及学弟学妹,没有你们我们无法完成这项艰巨的工作。

实验一:本次试验中对交换机的基本配置的学习研究有了新的体会,在计算机上配置交换机的基本配置,掌握交换机命令行各种操作模式的区别,以及模式之间的切换。实现上有了一定的突破,在配置过程中用到的命令,让我感觉到英语也要多学习,尤其是专业英语,对配交换机有很大方便!

实验二:这次实验关于交换机的全局配置,通过交换机的全局的基本配置,让我充分明白配置交换机的设备名称和配置交换机的描述信息必须在全局配置模式下执行。hostname配置交换机的设备名称。当用户登录交换机时,你可能需要告诉用户一些必要的信息。你可以通过设置标题来达到这个目的。你可以创建两种类型的标题:每日通知和登录标题。bannermotd配置交换机每日提示信息motdmessageoftheday。bannerlogin配置交换机登录提示信息,位于每日提示信息之后。

实验三:做实验既能加深我们对实验原理的理解和认识,学会应用这些原理,又能煅炼我的动手能力,通过这次实验让我明白对于网络,我们要树立重视实践更甚于重视理论的观点!业余时间扩宽计算机网络硬件方面的视野,尤其希望可以去电信公司的机房参观学习,提高个人修养与能力;加强本实验小组内部各成员之间的交流,现在的团队合作精神很重要,要及早的去培养。

实验四:这次实验总体来说没什么困难,都是一些基本的交换机配置,但是最后的思考题中提出一些问题还是很有意思的,配置起来也很有趣。主要是查看交换机的系统和配置信息。主要要到的技术原理是查看交换机的系统和配置信息命令要在特权模式下执行。

重组dna分子导入受体细胞后是否得到扩增,扩增后的重组dna分子是否正确,导入的重组dna分子是否含有正确的插入片段,重组dna分子能否表达插入的目的基因,一般可以采用x-gal筛选的方法对重组dna分子进行鉴定。

四、实验中的注意事项

1、大肠杆菌液体培养基和固体筛选培养基制备:

1)接种过程中,试管或三角瓶口等,也可通过火焰灼烧灭菌。

2)培养基、橡胶制品、塑料制品等不能使用干热灭菌。

3)在加热过程中应不断搅拌,以防琼脂粉沉淀糊底烧焦,并应控制火力,以免培养基起泡而溢出容器。

4)注意培养基分装时避免其沾污三角瓶口、试管口。

5)严格按照高压蒸汽灭菌的灭菌指标(温度、压力、时间)对培养基、器皿灭菌,确保灭菌彻底。

2、大肠杆菌工程菌平板培养:

1)划线分离时,挑菌量要小,严格无菌操作,避免环境中的杂菌污染。

2)画线时接中环圈内不能有菌膜产生,会造成接种数过多,结果不明显。

3、pcr扩增目的基因片段:

1)pcr体系所加成分的实际用量,应根据实验者选用的该成分的终浓度及所拥有的贮备液浓度进行核算。

2)加样时要认真,吸头垂直进入试剂管,每加完一样要换一个吸头,同时在已加的样品前做个记号以防止错加或漏加,避免污染。

3)taq聚合酶(置于冰盒上)应最后加入,尽量减少室温接触机会。加酶时吸头深入不可过深,酶量不能过多。

4、回收目的基因与载体连接:

1)注意调转速

2)敞开管盖放置

3)向吸附膜中间位置悬空滴加30ul洗脱缓冲液te(洗脱缓冲液te需使用前60℃水浴预热)

4)盖好管盖,静置10min

5、大肠杆菌液体培养:

1)接种环节应严格进行无菌操作。

2)实验中要注意细菌的生长状态和密度,尽量使用对数生长期的细胞。密度过高或不足均会使转化率下降。菌体密度与震荡培养的转速密切相关,根据测定的菌液od值调整培养时间。

3)接种的试管、三角瓶等应做好标记,注明菌种、日期、组别、姓名等。

6、大肠杆菌感受态细胞制备及转化:

1)所有操作均应在无菌条件和冰上进行。

2)所使用的器皿必须经过灭菌。并且要防止迹量的去污剂或其它化学物质、杂菌、dna酶或杂dna所污染,否则会大大降低细菌的转化效率。

3)注意转化的质粒dna的质量和浓度。当加入的外源dna的量过多或体积过大时,则会使转化率下降。以质粒为载体的重组分子而言,分子量大的转化效率低,大于30kb的重组质粒将很难进行转化。

4)实验所用的溶液最好用3次蒸馏水配制。

7、筛选重组转化菌落:

1)在含有x-gal和iptg的筛选培养基上,携带载体dna的转化子为蓝色菌落,而携带插入片段的重组质粒转化子为白色菌落,平板如在37℃培养后放于冰箱3-4小时可使显色反应充分,蓝色菌落明显。不是一开始就4℃,是等菌长出来之后。一般菌长出来就会有蓝色的了,4℃之后会进一步显色。

2)当出现蓝斑较大,白斑很小附在周围,还有蓝白镶嵌的斑即卫星菌落的时候,可以小心挑取中间的那个菌落,有可能是阳性克隆。

3)要注意培养时间不宜过长,出现阳性菌落就及时处理,以12-16小时为宜。4)培养基中加抗生素的时候,温度不能高了,不烫手为宜,防止抗生素失效。

8、菌液pcr分析:

注意移液枪正确的使用方法,各种量程的调试,一般以接近最大量程的为准。

9、取大肠杆菌重组质粒dna和酶切分析

1)《质粒小量提取试剂盒》进行质粒的提取的第三步和第四步之间的时间,操作要流畅快速,决定了实验成败

2)禁止吸出沉淀

五、总结

在分子生物学中,基因克隆是一种常用的技术。其中关键技术是dna重组技术,它利用酶学方法将不同来源的dna分子进行体外特异性切割,重新拼接组装成一个新的杂合dna分子。在此基础上将杂合dna分子转入一定宿主细胞中进行扩增,形成大量的子代分子,此过程称基因克隆。有目的地通过基因克隆技术,人为操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程总称为基因工程。

基因工程是把双刃剑。如果不加节制的使用基因工程,让它去为你包治百病,那样你的整体免疫系统也将发生错乱,让你完全可以抵挡的疾病访问造成你的死亡。如果人们想造什么动物就造什么动物,让这些动物急速的泛滥,动物的天敌关系,人类的生态平衡都将被破坏,动物也将超过人类,霸占我们赖以生存的地球。而且,若是谁都想起死回生,我想终有一天我们将因为人口泛滥而灭亡。

基因工程知识一种让科技发展的手段,而不是我们的目的,我们要遵循自然规律,正确的对待基因工程,正确的对待生活。

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